荧光分光光度计是一种常用的实验仪器，用于分析研究物质的荧光特性。相比于传统的吸收光谱分析方法，荧光分光光度计具有更高的灵敏度和更宽的应用范围。然而，使用荧光分光光度计需要遵循一定的操作方法，其中之一就是设置两个不同的光源。

首先，我们来了解一下荧光的基本原理。荧光是指物质在吸收能量后，产生能量辐射的现象。当物质吸收紫外线光线后，电子会从基态跃迁到激发态，接着再从激发态跃迁回基态，释放出荧光光子。荧光分光光度计的原理就是通过测量物质所发射的荧光光子的强度，来获得样品的荧光光谱信息。

使用荧光分光光度计时，为什么要设置两个光源呢？主要原因有两点。首先，不同波长的光源可以提供不同的激发能量，从而产生不同的荧光光谱。由于不同的物质对不同波长的光有不同的吸收能力，通过使用不同波长的光源，我们可以更全面地了解样品的特性。其次，设置两个光源也可以用于校正仪器和样品的非荧光背景信号。其中一个光源用于激发样品产生荧光信号，另一个光源可以用于校正背景信号，从而提高测量的准确性和可靠性。

在实际使用中，我们需要根据样品的特性和实验需要，选择合适的激发波长和校正波长。通常，常见的激发波长为紫外光和可见光，而校正波长则根据荧光光谱的特点来确定。在荧光分光光度计中，激发波长和校正波长可以通过选择合适的滤光片或光栅来实现。

除了设置两个光源外，使用荧光分光光度计还需要注意以下几点。首先，样品的浓度应适当，过高或过低都会影响测量结果的准确性。其次，控制好激发光的强度，过弱或过强都不利于获得可靠的荧光信号。此外，在选择滤光片或光栅时，要注意其透光率和波长范围，以确保测量的准确性和精度。

总之，荧光分光光度计在化学、生物、药学等领域具有广泛的应用，可用于分析物质的荧光特性。设置两个不同波长的光源是为了提供不同的激发能量和校正背景信号，从而获得准确可靠的荧光光谱结果。在实际使用中，我们需要根据样品的特性和实验需要，选择适当的光源和仪器参数，以获得最佳的测量效果。